在试管婴儿助孕过程中,需要女方提供优质的卵子,男方提供高质量的精子。试管婴儿技术有两种受精方式:常规体外受精和卵胞浆内单精子显微注射受精。理论上,卵胞浆内单精子显微注射受精需要一条精子,而常规体外受精需要5000到10000条优质精子。下面,我将介绍胚胎学家们如何优化精液,获取优质精子。
胚胎学家如何处理基本正常的精液样本?
胚胎学家使用三种主要方法优化精子:密度梯度离心法、直接上游法和简单洗涤法。
密度梯度离心法利用精子的运动能力和细胞密度的差异来分离精子,使其在试管底部形成沉淀,从而得到质量较好的精子,这些精子无白细胞、无不成熟生殖细胞。
直接上游法是通过精子自身的运动能力将其从精液中分离。这种方法可以得到活力强的精子。这就是将培养液加到液化精液上面,或者将液化精液加到培养液上面,活动的精子会游到培养液里。结合密度梯度离心和上游法筛选出来的精子不仅活力强,损伤少,而且能更好地排除杂质的影响,对提高精子存活率和DNA完整性有良好效果。
简单洗涤法是向精液中加入等体积的培养基以稀释精液,离心后去掉上清液,收集沉淀物重新悬浮在培养基中并再离心,弃去上清液后将沉淀物重新悬浮在适量的培养基中备用。这种方法不能去除死精子、碎片和其他细胞成分,如白细胞、圆形细胞。因此,现在体外受精通常不使用这种方法。但对于严重少弱精症的精子制备、睾丸活检或睾丸显微切开取精术收集的睾丸精子,仍可使用这种方法,因为在进行卵胞浆内单精子显微注射受精时,活动精子是由操作者在倒置显微镜下人工收集和获取的。
胚胎学家如何处理特殊的精液标本?
在临床工作中,胚胎学家会遇到一些特殊情况,如逆行射精、精液液化异常、精液量过少和精液中含有大量颗粒状物质。
逆行射精是指精液进入膀胱而非尿道口。对此,医生会让患者在取精前口服碳酸氢钠,然后取精前排尿,但不完全排空膀胱。取精时,精液和尿液会被收集在不同的容器中。胚胎学家会用密度梯度离心法处理精液,对于尿液,他们会先用培养基中和,然后通过离心法浓缩,再用密度梯度离心法获取优质精子。
对于不液化的精液,胚胎学家会用吸管轻柔地吹打。如果还是不液化,他们会加入培养液再次吹打。
如果精液量过少,他们会加入培养液增加体积,以便离心。
如果精液中含有大量颗粒状物质,他们会先通过简单离心将颗粒状物质沉降,再吸取上层精液进行后续处理。
如何保证精液的处理不出错?在我们的中心,每个离心机只处理一个患者的精液标本。一份标本处理完毕后,才会处理下一个。此外,每个患者的试管上都有电子标签,显示夫妻的姓名和病历号。在每一步处理前,都会扫描电子标签进行核对,并有两个人进行人工核对,确保精液处理的准确无误。
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